Bíótín peptíð

Hvað eru bíótínýleruð peptíð?

Bíótínýleruð peptíð eru peptíð sem hafa verið breytt til að innihalda bíótínhluta. Þessi breyting nýtir sér mikla-sækni milli bíótíns og avidins eða streptavidíns, sem er mikið notað í líffræðilegum og lífefnafræðilegum notkun. Bíótín sameindin er lítil, stöðug og breytir ekki marktækt uppbyggingu eða virkni peptíðsins, á sama tíma og hún gerir mjög skilvirka fanga eða greiningu í gegnum avidin-byggð kerfi.

 

Efnafræðileg breyting
Bíótín er venjulega flutt inn í gegnum NHS-bíótín (N-hýdroxýsúkkínímíðbíótín) hvarfefni, sem hvarfast við aðal amínhópa sem finnast á N-enda peptíðsins eða lýsínleifum og myndar stöðugt amíðtengi.

生物素（Bíótín） 肽（Peptíð）

COOH NH₂

| |

+---EDC/NHS---→ 活化羧基（Virkja） → 缩合（Tenging）

↓ ↓

Bíótín-CONH-peptíð

 

Affinity Interaction
Bíótínýleraða peptíðið getur bundist sterkt (Kd ~10⁻¹⁵ M) við avidin eða streptavidín, sem gerir það tilvalið til notkunar í prófum sem krefjast nákvæmrar uppgötvunar, fanga eða hreyfingarleysis.

Bíótínýlerað peptíð nýmyndun tilvik

Peptíðaröð: Bíótín-Ahx-YXXXXXRXRRR-NH2

Lengd: 11A

Purity: >95%

M.W: 1898.32

Peptíðaröð: Bíótín-YXXXXXRXRRR--ERXXXDLXXXXPVXXXXPRR

Lengd: 31A

Purity: >95%

M.W: 4145.89

 

Notkun bíótínýleraðra peptíða

Bíótínýleruð peptíð eru fjölhæf verkfæri í rannsóknum og iðnaði, með fjölbreytt úrval af forritum, þar á meðal:

Affinity Hreinsun

Notað til að hreinsa bindiaðila eins og prótein, mótefni eða kjarnsýrur með því að binda líftínýleraða peptíðið á streptavidínperlur.

ELISA og Western Blotting

Bíótínýleruð peptíð virka sem rannsaka til að greina sérstakar milliverkanir þegar þau eru tengd avidin-HRP eða avidin-flúrljómandi merkjum.

Surface Plasmon Resonance (SPR)

Notað til að stöðva peptíð á lífskynjaraflögum fyrir rannsóknir á milliverkunum.

Fíkniefnauppgötvun

Skimun lyfjaframbjóðenda með því að greina bindingu þeirra við líftínýleruð peptíðmarkmið.

Ónæmisfræði

Bíótínýleruð peptíð eru notuð til að kortleggja epitopur, rannsaka mótefnavaka-mótefnasamskipti og framkvæma T-frumugreiningar.

Epitope kortlagning fyrir þróun bóluefnis

Sérsniðið bíótínýlerað peptíð var notað til að bera kennsl á mótefnavaka af völdum veirupróteins, sem hjálpaði til við að hanna bóluefnisframbjóðanda.

Prótein-Próteinvíxlverkunarrannsóknir

Bíótínýleruð peptíð sem voru óhreyfð á streptavidín-húðuðum plötum gerðu kleift að rannsaka viðtaka-bindilvíxlverkun, sem leiddi í ljós bindisækni sem er mikilvæg fyrir þróun lyfja.

Ónæmisprófun fínstilling

Í greiningarprófi voru bíótínýleruð peptíð notuð sem mótefnavakar til að bæta næmni og sérhæfni ELISA fyrir greiningu lífmerkja sjúkdóma.

 

Heimildir

1. Grænn, NM (1975).Avidin og streptavidín.Biochemical Journal, 131(3), 781-791.

2. Chaiet, L. og Wolf, FJ (1964).Eiginleikar streptavidíns, bíótín-bindandi prótein sem Streptomyces framleiðir.Archives of Biochemistry and Biophysics, 106(1), 1-5.

3. Finn, FM, & Titus, G. (1994).Biotinylering próteina í rannsóknum og líftækni.Anal Biochem, 218(1), 1-7.